研究报告

日本结缕草 ZjHCT 基因的克隆及转录自激活检测  

董笛1 , 王焕英2 , 滕珂3 , 檀鹏辉1 , 晁跃辉1 , 韩烈保1
1 北京林业大学草坪研究所, 北京, 100083; 2 包头市环境保护局昆区分局, 包头市, 014000; 3 北京草业与环境研究发展中心, 北京, 100097
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 17 篇   
收稿日期: 2018年07月30日    接受日期: 2018年09月10日    发表日期: 2019年08月15日
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摘要

莽草酸/奎宁酸羟基肉桂酰转移酶(shikimate/quinate hydroxycinnamoyl transferase, HCT)是木质素生物合成的关键酶之一,也是不同类型木质素相互转化的调控物质。日本结缕草(Zoysia japonica)是一种应用广泛的暖季型坪草。以日本结缕草为材料,利用 PCR 技术克隆日本结缕草 ZjHCT 基因完整编码区,结果显示,日本结缕草 ZjHCT 基因编码区全长 1 284 bp,共编码 428 个氨基酸。生物信息学分析显示,ZjHCT 蛋白组件中,随机线圈和 螺旋含量最多,其不具备信号肽,定位在细胞质内的概率最大。利用 DNA 重组技术,构建pBGKT7-ZjHCT 载体并进行 Y2H Gold 酵母菌株转化及自激活检测,证明 ZjHCT Y2H 酵母菌株中不具备自激活功能,可在日本结缕草中进行互作蛋白筛选实验,为深入研究日本结缕草木质素合成及提高日本结缕草草坪草耐践踏性,改善坪用质量提供帮助。

关键词
日本结缕草;HCT 基因;转录自激活;生物信息学

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《分子植物育种》印刷版
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